一、生物安全柜的分级原理
生物安全柜根据防护等级分为一级(I级)、二级(II级)和三级(III级),其设计原理基于气流控制和过滤技术,核心目标是为操作人员、实验材料和环境提供不同级别的保护。
- I级生物安全柜
- 原理:通过前窗操作口吸入负压气流,保护操作人员;排出气流经高效过滤器(HEPA)过滤后排出,防止微生物气溶胶扩散至环境。
- 特点:仅保护人员和环境,不保护实验材料;适用于低风险微生物操作(如细菌培养)。
- 应用场景:实验室级别为一级或二级时,用于处理低风险病原体(生物安全等级1级和2级)。
- II级生物安全柜
- 原理:通过垂直层流气流,结合前窗操作口吸入的负压气流,形成三重保护(人员、实验材料、环境)。
- 细分类型:
- A1型:70%气体循环,30%外排,适用于低挥发性化学品和放射性核素。
- A2型:改进型A1,适用于微量挥发性化学品和放射性核素。
- B1型:70%外排,30%循环,适用于中等挥发性化学品和放射性核素。
- B2型:全排型,无循环风,适用于高挥发性化学品和高放射性核素。
- 应用场景:广泛应用于生物医学研究、制药生产和临床实验室,适用于处理中等风险病原体(生物安全等级2级和3级)。
- III级生物安全柜
- 原理:完全封闭结构,操作人员通过手套箱进行操作,所有空气经过双重HEPA过滤器处理,确保绝对隔离。
- 特点:提供高级别保护,适用于高风险病原体(生物安全等级4级)。
- 应用场景:用于BSL-4实验室,处理如埃博拉病毒、出血热病毒等高风险病原体。
二、生物安全柜的选择指南
选择生物安全柜时,需综合考虑实验室级别、实验类型、病原微生物危险水平及操作需求。
- 实验室级别与安全柜匹配
- 一级实验室:无需使用生物安全柜,或使用I级生物安全柜。
- 二级实验室:
- 可能产生微生物气溶胶或溅出的操作,使用I级生物安全柜。
- 处理感染性材料时,使用部分或全部排风的II级生物安全柜。
- 涉及化学致癌剂、放射性物质和挥发性溶媒时,使用II-B级全排风(B2型)生物安全柜。
- 三级实验室:使用II级或III级生物安全柜;涉及感染材料的操作,使用全排风型II-B级(B2型)或III级生物安全柜。
- 四级实验室:使用III级全排风生物安全柜。
- 实验类型与安全柜类型选择
- 微生物样本操作:使用基本型生物安全柜(I级或II级)。
- 微生物样本与微量化学试剂(非腐蚀性):使用配有外部排放管的II级生物安全柜(A1型或A2型)。
- 细胞毒性药物操作:使用细胞毒性安全柜。
- 高挥发性化学品或高放射性核素操作:使用II-B级全排风(B2型)生物安全柜。
- 操作需求与安全柜功能匹配
- 操作窗口吸入气流形成负压气流屏障:I级和II级生物安全柜依赖此原理,但需注意气流屏障在安全柜停止运行或故障时失效的风险。
- 完全封闭结构与手套箱操作:III级生物安全柜提供高级别保护,适用于高风险病原体操作。
- 排风要求:B2型生物安全柜排风量较大,实验室需考虑补风问题;排风管道需采用密闭式连接,并保持负压。
三、生物安全柜的选择注意事项
- 性能测试指标:确保生物安全柜达到性能测试指标,避免实验中危害性气溶胶释放到空气中,危害人员和环境安全。
- 维护保养记录:根据性能测试方法,记录维护保养、期间核查和校准记录,确保安全柜长期稳定运行。
- 操作规范:减少手臂在安全柜内的大幅度动作或频繁进出,避免扰动安全柜窗口吸入气流,削弱气流屏障作用。